ALiCE^®无细胞蛋白表达试剂盒（植物细胞裂解液）

An eukaryotic cell free expression system with unprecedented 3 mg/mL recombinant protein yield in batch mode and post-translational modifications enabled

一般描述

源自粗细胞提取物的无细胞蛋白表达（CFPE）系统已被用作研究工具数十年，并为蛋白表达技术引入了许多有吸引力的优势。然而，作为基于细胞的方法的替代方法，采用CFPE系统的关键障碍是蛋白产量相对较低的问题。

为了解决这个问题，ALiCE^®利用植物细胞生物学的优势创建了一种新型的无真核细胞表达系统。ALiCE^®以批量模式提供了高达3mg/mL的蛋白的空前产量。因此，它使您能够克服活宿主系统的局限性，并在数小时而不是数周内获得“难以生产”的蛋白质。

ALiCE^®利用耗尽液泡的烟草细胞裂解物。该系统包含体外转录（RNA聚合酶，NTP）和翻译反应（核糖体，翻译起始/延伸因子，tRNA等）所需的全部因子。使用简单的方案，RNA转录和翻译都在一个试管中进行（偶联的转录/翻译）。

通过简单地将质粒DNA与ALiCE^®反应混合物混合来开始反应。ALiCE^®出色的蛋白产率基于在反应过程中高效的蛋白表达。因此，我们建议反应持续时间为48小时。

ALiCE^®提供了两种表达载体pALiCE01和pALiCE02，它们根据目标蛋白的靶向作用而使用。这些经过专门定制，可在与ALiCE^®表达系统一起使用时提供出色的蛋白产量。pALiCE01用于在ALiCE^®胞质部分中的表达。用pALiCE02靶向微粒体提供了表达具有翻译后修饰（如二硫键）的蛋白的机会。

应用

除了筛选外，ALiCE^®系统还可以用于靶蛋白的更大规模表达。ALiCE^®系统的其他潜在应用包括：
 

• 靶蛋白表征
• 蛋白质优化
• 突变体筛选
• 蛋白质与蛋白质的相互作用
• 表达分析
• 蛋白定位分析
• 蛋白结构分析
• 翻译后修饰分析
• 代谢组学
• 除草剂筛选

特点和优势

ALiCE^®无细胞蛋白表达试剂盒利用源自植物细胞的细胞裂解物以分批模式生产3mg/mL的重组蛋白。

• 高产率：高达3 mg/mL的表达蛋白
• 易用性：一步反应方案
• 快速：短短48小时内的高产率
• 灵活：表达“难以生产”的蛋白质、细胞毒性蛋白质等。

组分

ALiCE^® Mini Kit - AL0103050 包括
ALiCE^® 裂解物，6 x 50 μL
载体pALiCE01，15 μL
载体pALiCE02，15 μL
ALiCE^® 管帽，0.6 mm孔

ALiCE^® Midi Kit - AL0103200包括
ALiCE^® 裂解物，6 x 200 μL
载体pALiCE01，50 μL
载体pALiCE02，50 μL
ALiCE^®管组，12件

ALiCE^® Maxi Kit - AL0103500包括
ALiCE^® 裂解物，6 x 500 μL
载体pALiCE01，50 μL
载体pALiCE02，50 μL
ALiCE^®管组，12件

储存及稳定性

• ALiCE^®反应（裂解物）混合物：储存于-70℃
• 载体pALiCE01：储存于-20℃至-70℃
• 载体pALiCE02：储存于-20℃至-70℃
• ALiCE^®管帽/管组：储存于室温

关于Leniobio

LenioBio 是一家生命科学生物技术公司，开创了颠覆性蛋白质表达平台。利用我们的 ALiCE 技术，我们使我们的客户（研究人员和生物制药制造商）能够简化和加速他们的蛋白质发现、开发和生产流程。我们的目标是简化制造并加快向患者提供药物的速度。
LenioBio总部位于德国杜塞尔多夫，由Remberto Martis 博士于2016 年 9 月创立，公司团队包括商业资深人士和蛋白质表达专家。2018年2月，LenioBio获得了Corteva Agriscience™（前陶氏益农）的ALiCE 技术独家许可，以进一步开发所有行业的技术并将其商业化。 ALiCE 试剂盒是作为研究和临床前开发的表达试剂盒推出的。与目前市场上任何其他无细胞表达系统相比，真核无细胞试剂盒可为客户提供单步最高蛋白质产量。

2022 年 6月8日LenioBio GmbH 宣布：一个重要里程碑，其无细胞蛋白质合成 (CFPS) 平台 ALiCE® 成功线性扩展至工业规模。
通过一系列突破性发展，ALiCE® 现在可用于在高达 10 升的反应体积中生产高达 3 克/升的复杂功能性蛋白质，而无需进行大量的工艺开发和优化，也不会影响蛋白质产量。这为真核蛋白质表达迈出了重要一步。 

与其他无细胞表达系统相比，ALiCE® 规模化的关键区别在于其在保持活细胞蛋白质生产机制完整方面的独特成就：主动能量供应以及蛋白质折叠、二硫键和糖基化所需的一切。

与基于细胞的蛋白质替代品相比，CFPS 系统具有许多优点，包括更短的蛋白质生产时间（数小时与数月），以及生产通常对活细胞有毒的水平的蛋白质的能力。然而，由于缺乏能够大规模可靠运行的系统，CFPS 在工业蛋白质制造中的广泛采用受到了阻碍。